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技術(shù)小知識(shí)：被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會(huì)受損嗎?

我們知道，完整的ELISA試劑盒包含：

①酶的底物；

②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；

③酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)；

④結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

⑤洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

⑥陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中)；

⑦酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

那么被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會(huì)受損嗎？景源實(shí)驗(yàn)為您解答：

為其保存后可以使用，但不能反復(fù)凍融，如果您在一周之內(nèi)做實(shí)驗(yàn)，可以2-8℃保存;如果您在一周至一個(gè)月之內(nèi)做實(shí)驗(yàn)，可以-20℃保存如果您在一個(gè)月以上做實(shí)驗(yàn)，可以-80℃保存。但是值得注意的是凍融一次比2-8℃保存損失的更大損失主要是蛋白的降解，凍融一次蛋白都有降解。

在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)物的天生可達(dá)ding峰。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時(shí)要平置于操縱臺(tái)上即可。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。操縱時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在劃定的范圍內(nèi)，尺度室溫溫度是指20～25℃，但詳細(xì)操縱時(shí)可根據(jù)仿單的要求控制溫育。